PCR技術的更新?lián)Q代，似乎都遵循了這樣一個規(guī)律，那就是新一代試劑盒或多或少會解決上一代技術存在的問題，如檢測敏感性逐漸得到提升、檢測步驟逐漸得到簡化、實驗室污染逐漸得到控制。

　　一代試劑盒采用電泳法進行結果鑒定，那時實驗室人員對污染還沒有清楚的認識，當從“飲水中”也擴增出“結核桿菌”時，才意識到問題的嚴重性，于是暫停PCR技術在臨床診斷中的應用。人們把污染的癥結歸為“電泳”二字，隨后出現(xiàn)了“ELISA-PCR”或雜交梳等核酸檢測方法，由于同樣是產物開放性鑒定，并沒有改變污染成災的事實，反而使人們對PCR技術能否用于臨床診斷產生質疑。

　　二代熒光PCR技術的產生，由之前的開放性核酸鑒定方法，變成由熒光染料或Taq MAN探針為信號源的閉管鑒定，避免了擴增產物外泄的實時熒光PCR技術，事實證明實驗室污染并沒有得到*控制，一些研究人員認為煮沸得來的核酸干擾物質太多，是影響檢測敏感性的主要原因。

　　三代試劑盒“微量核酸釋放劑”法操作簡單、快速，很受實驗室人員歡迎，但實驗室污染也并未因此得到解決。

　　之后出現(xiàn)的四、五代試劑盒技術出現(xiàn)解決了往代試劑盒存在的缺陷，是為臨床熒光PCR技術的一場革命。